生物安全柜,是一種為操作原代培養物、菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時,用來保護操作者本人、實驗材料、實驗室環境及室外環境,使其避免暴露于上述實驗操作過程中可能產生的感染性生物氣溶膠和濺出物而設計的重要的一級屏障隔離設備。其主要是通過柜體和氣流形成的物理隔離來保護操作者本人、實驗材料、實驗室環境及室外環境。影響生物安全柜綜合使用性能和防護性能的因素綜合起來主要有以下幾個方面:
1.生物安全柜的選型原則
當實驗室級別為一級時一般無須使用生物安全柜,或使用Ⅰ級生物安全柜。實驗室級別為二級時,當可能產生微生物氣溶膠或出現濺出的操作時,可使用Ⅰ級生物安全柜;當處理感染性材料時,應使用部分或全部排風的Ⅱ級生物安全柜;若涉及處理化學致癌劑、放射性物質和揮發性溶媒,則只能使用Ⅱ-B級全排風(B2型)生物安全柜。實驗室級別為三級時,應使用Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜;所有涉及感染材料的操作,應使用全排風型Ⅱ-B級(B2型)或Ⅲ級生物安全柜。實驗室級別為四級時,應使用Ⅲ級全排風生物安全柜。當人員穿著正壓防護服時,可使用Ⅱ-B級生物安全柜。
需要特別指出的是,Ⅰ、Ⅱ級生物安全柜主要是靠操作窗口吸入的負壓氣流或垂直下降氣流形成的氣流屏障起到保護人員或操作樣品的作用,但這種由氣流作用形成的局部隔離環境并不是絕對安全的。主要體現在以下幾個方面:
Ⅰ、Ⅱ級生物安全柜均靠從操作窗口吸入氣流形成負壓氣流屏障,一旦生物安全柜停止運行或故障,這種氣流的隔離作用就不復存在,若安全柜處理危險度很高的病原體或化學物質會存在外逸風險;
對于在Ⅰ、Ⅱ級生物安全柜操作窗口進行操作的實驗人員應盡量減少手臂在安全柜內的大幅度的動作或者頻繁的進出動作,這也會擾動安全柜窗口吸入氣流,削弱安全柜的氣流屏障作用;
對于附著于手或者器具上的病原體,這種氣流隔離作用也會失效;
空氣中的氣體成分可以穿透高效過濾器,所以非全排型的Ⅰ、Ⅱ級生物安全柜由于有循環風的存在,并不適合進行高濃度的危險氣體物質操作。
Ⅲ級生物安全柜可以最高程度的保護操作人員和外部環境,同時兼顧保護安全柜內實驗物品。Ⅲ級安全柜適用于操作危險度4級的病原微生物或感染動物。
綜上,在進行生物安全柜的選型時必須綜合考慮實驗操作對象的性質類別、安全防護需求、實驗室本身狀況以及經濟節能的需求,使其既能滿足實際實驗工作的需求又能達到安全的目的。
2.生物安全柜的使用及注意事項
應做好生物安全柜啟動前的準備工作。
實驗操作者應提前佩戴好個人防護裝備;
安全柜開啟前用75%的酒精或其它消毒劑全面擦試安全柜內的操作臺面和其它平面;
打開前操作窗至規定高度后開啟生物安全柜,開啟后要運行一段時間,以保證安全柜氣流穩定,并將工作區空氣中的污染物完全清除;
實驗開始前應將本次實驗需要的所有物品擦拭干凈后提前放入安全柜內,以避免在實驗過程中頻繁拿取物品造成安全柜氣流波動;
安全柜內不放與本次實驗無關的物品,柜內物品擺放應做到清潔區、半污染區與污染區基本分開,操作過程中物品取用方便,且三區之間無交叉,物品應盡量靠后放置,但不得擋住回風格柵。
實驗操作應規范。
技術要點如下:
正確運用微生物學實驗技術;
操作期間如果需要取出或移入物品,應盡量緩慢地移出或移入手臂,盡量減小空氣的攪動,從而避免因手臂的移動破壞安全柜氣流而導致危險氣溶膠的逸出;
柜內移動物品時應盡量避免交叉污染,需按照低污染物品向高污染物品移動的原則,應避免高污染物品在移動過程中對柜內產生大面積的污染;
在實驗操作時,不可打開玻璃視窗,應保證操作者臉部在工作窗口之上;在安全柜中應盡量避免使用產生振動的設備,如使用此類設備,如離心機、攪拌器等,應將此設備放在安全柜的最里側,并在運行時停止其它的實驗操作;
通常來說,在安全柜內不應使用點火裝置,由于火焰產生的上升熱氣流會影響用以保護柜內物品的垂直下降氣流,火焰還會產生氣流擾動,進而增加交叉污染的風險;
任何灑濺在柜內的東西都應立即清除干凈,并放在專用的垃圾袋中;
在安全柜工作時盡量減少背后人員走動以及快速開關實驗室房門,以防止干擾安全柜內氣流;如果在正常狀態下,安全柜報警,則應立即停止柜內的一切工作,并對報警進行檢查,在查明原因并解決問題前不應再使用此安全柜。
實驗操作完成應妥善關閉安全柜:
技術要點如下:
將所有的物品取出,并用75%的灑精擦拭柜內各面,關閉安全柜前再運行一段時間,以便將工作區操作過程中產生的微生物氣溶膠排出,同時開啟紫外線照射至少半小時以上;
妥善處理所有實驗過程中產生的廢棄物,如有必要,將所有害生物廢料進行高壓消毒。
實驗操作人員應樹立生物安全意識,養成良好操作習慣,杜絕違規操作,嚴格遵照微生物學標準操作規程和操作規程進行實驗操作,同時生物安全柜的日常維護和監管工作應落實到位,建立科學的管理制度并嚴格執行,以確保實驗室生物安全。
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